胶原蛋白是许多组织外基质的主要结构蛋白。羟脯氨酸是胶原蛋白的主要成分,占其氨基酸组成的约13.5%。由于在胶原蛋白中的分布非常有限,羟脯氨酸的含量可以准确反映胶原蛋白的数量。因此,定量羟脯氨酸已被用于评估组织纤维化或胶原蛋白沉积。然而,传统的羟脯氨酸检测方法因需要繁琐的程序和特殊工具而不太实用。
Chondrex提供了一种羟脯氨酸检测试剂盒(产品编号6017),该试剂盒采用改进的检测系统,可以方便、精确地使用96孔板进行操作。该试剂盒能够定量任何组织样本或组织匀浆中的总胶原蛋白含量,无论胶原蛋白的类型或物种如何。Chondrex还提供其他针对不同用途的胶原蛋白检测试剂盒。首先,Sirius Red总胶原蛋白检测试剂盒(产品编号9062或9062P)可用于定量样本中溶解的胶原蛋白。其次,针对各种物种的I型或II型胶原蛋白的ELISA检测试剂盒可用于区分样本中的胶原蛋白类型和物种。最后,Sirius Red/Fast Green胶原蛋白染色试剂盒(产品编号9046)是一种半定量检测方法,用于确定组织切片中的总胶原蛋白含量。
Chondrex羟脯氨酸测定试剂盒--检测盒用于定量总胶原蛋白含量(无论类型或物种)。

艾美捷羟脯氨酸测定试剂盒:
货号:6017
格式:96孔ELISA板,带可拆卸条。
检测类型:比色法检测。
检测时间:1小时。
标准范围:400 ug/ml到6.3 ug/ml。
样本数量:每板最多可处理40个(重复)无色样本,和最多20个(重复)有色样本。
样本类型:组织匀浆和细胞培养基。
推荐样本稀释:不需要。
着色剂:不适用(在530-560 nm读取)。
存储:-20°C。
验证数据:组内重复(3.4-6.3%)/组间重复(5.1-7.6%)/加标测试(91-95%)。
注释:选择性样本可能需要24小时水解步骤。
样本水解:
在一个玻璃螺纹瓶中称取10毫克的组织样本。
添加100微升蒸馏水。
用小铲子将组织样本捣碎。
注意:可以使用100微升的样本匀浆。跳过步骤1-3,直接将100微升的样本匀浆添加到瓶中。
添加100微升浓盐酸(10N),并紧紧拧上特氟龙盖。
在120°C下孵育24小时。孵育期间定期混合样本。
注意:可以使用加热块或干浴来进行孵育。
冷却。冷却之前不要打开瓶盖。
使用上清液进行检测。
注意:在水解过程中,组织样本有时会产生黑色残留物。然而,样本的水解应该在孵育结束时完成。如果样本中仍然存在水解后的黑色残留物,请转移到微量离心管中,并以10,000 rpm离心3分钟。收集上清液。
Arthrogen-羟脯氨酸测定试剂盒文献参考:
1. N. Blumenkrantz, G. Asboe-Hansen, A Quick and Specific Assay for Hydroxyproline. Anal Biochem 55, 288-91 (1973).
2. G. Reddy, C. Enwemeka, A Simplified Method for the Analysis of Hydroxyproline in Biological Tissues. Clin Biochem 29, 225-9 (1996).
3. C. Rogers, J. Kimmel, M. Hutchin, H. Harper, A Hydroxyproline Method of Analysis for a Modified Gelatin in Plasma and Urine. J Biol
Chem 206, 553-9 (1954).
4. R. Neuman, M. Logan, The Determination of Hydroxyproline. J Biol Chem 184, 299-306 (1950).
https://www.amyjet.com/products/Chondrex-6017.shtml