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当前位置: 安捷伦 应用文献 QuEChERS 结合 UHPLC-MS/MS 技术分析土壤中的 59 种抗生素

QuEChERS 结合 UHPLC-MS/MS 技术分析土壤中的 59 种抗生素

2025-07-22
  • 细胞生物学/分子生物学
  • QuEChERS 结合 UHPLC-MS/MS 技术分析土壤中的 59 种抗生素
摘要

抗生素是用于细菌感染的药物,广泛应用于人和动物的疾病预防和治疗,30%–90% 会通过排泄粪便和尿液的形式进入土壤、沉积物和水体环境中,不断富集,直接或间接地影响人类的健康。

本方法使用 QuEChERS 基质分散固相萃取净化并结合 Agilent 6475 QQQ 三重四极杆液质联用系统(LC-MS/MS),同时检测土壤中 59 种抗生素残留。该方法使用基质外标法进行定量,具有出色的灵敏度,目标化合物的线性相关系数(R2)均高于 0.99;目标化合物的回收率均在 60%–120% 之间,且所有化合物回收率的 RSD 均小于 20%,表现出良好的准确度和精密度。适用于土壤中抗生素多残留的定量分析。

实验部分


仪器:Agilent 1290 Infinity II 超高效液相色谱/6475 QQQ 三重串联四极杆液质联用系统

色谱柱:Agilent Poroshell 120 EC-C18(100 mm×3.0 mm,2.7 ?m;部件号 695975-302)

样品前处理:Agilent Bond Elut QuEChERS 基质分散净化试剂盒(部件号 5982-4956)、Agilent Captiva RC(再生纤维素)微孔滤膜(0.2 μm,15 mm;部件号 5190-5108)以及 Agilent 陶瓷均质子(用于 50 mL 离心管;部件号 5982-9313)

标准品和缓冲液制备

取适量抗生素标准品,以甲醇为溶剂配制得到浓度为 10 ?g/mL 的混合标准储备液,冷藏于 –20 °C 冰箱中。磷酸盐缓冲液:称取 27.2 g 磷酸二氢钾溶于 1 L 水中,向其中加入 1.35 mL 磷酸,混匀后备用。

样品前处理流程

图 1. 土壤中 59 种抗生素的前处理操作流程

色谱条件

色谱柱:Poroshell 120 EC-C18(100 mm×3.0 mm,2.7 ?m)

流速:0.4 mL/min

柱温:40 °C

进样量:2 ?L

流动相:A:0.1% 甲酸水;B:甲醇

洗脱程序:

时间(min)

B%

0.0

10

1.5

10

5.0

40

7.1

90

8.0

90

8.1

98

10.0

98

后运行时间:3 min

质谱条件

离子源模式:ESI 正/负离子扫描

干燥气温度:280 °C

干燥气流速:8 L/min

鞘气温度:350 °C

鞘气流速:12 L/min

雾化气压力:35 psi

毛细管电压:3500 V(+)/2500 V(-)

扫描模式:dMRM


结果与讨论


加标回收率和精密度

表 1. 土壤中 59 种抗生素的加标回收实验结果(n=6)

注:* 表示该化合物在空白中的检出量较高,导致回收率和 RSD 计算存在较大偏差;-表示该浓度并非定量限,不计算回收率。

如您对以上内容感兴趣,可以点击下方图片了解更多实验应用干货,助力轻松应对精准检测难点。


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