SCIEX中国本土化产品Triple Quad? 6500+质谱系统检测细胞中的能量代谢物

2025-03-28

SCIEX本土化产品

作为全球生命科学分析技术的创新者，SCIEX在2024年10月30日宣布在中国本土化生产SCIEX Triple Quad 6500+系统和QTRAP 6500+系统。这标志着SCIEX本土化战略的又一个里程碑，自2023年在中国苏州成功交付本土化SCIEX Triple Quad 4500系统、QTRAP 4500系统和SCIEX 5500+系列质谱以来，SCIEX 6500+系列高端质谱的2个型号也已经实现中国本土生产。

6500+系统是SCIEX高端三重四极杆/QTRAP质谱产品，在复杂基质中能为不同类型分子提供卓越的灵敏度。它为具有挑战性的检测设计，具备优异的可靠性和稳健性。其主要特点包括快速极性切换和多反应监测（MRM）速度，可兼容更灵活的色谱方法并提高检测通量。无论是利用四极杆功能还是线性离子阱QTRAP增强子离子扫描功能，都能为样品的鉴别、表征和定量带来新颖的发现。

概述

细胞能量代谢研究可借助于各种细胞模型, 鉴识细胞内源性能量代谢物, 直接反映细胞生命活动的生物标志物信息, 从而揭示有关细胞的代谢途径和过程, 对于体外研究药物作用下代谢物的变化及改变机制具有重要意义。能量代谢物中包含很多高能磷酸键化合物如ATP，ADP等，在进行液相质谱分析时，容易与管路中的金属离子络合导致峰型变差，灵敏度降低。

本文优化了流动相条件，通过加入亚甲基二膦酸来改善峰型，在本土化产品SCIEX Triple Quad^? 6500+系统上建立了300多种能量代谢物的检测方法，可以进行高通量靶向分析。

实验条件

液相方法

流动相：A: 90%水（含20mM乙酸铵，5μM亚甲基二膦酸）B: 90%乙腈（含20mM乙酸铵，5μM亚甲基二膦酸）

流速：0.3 mL/min

柱温：40 ℃

梯度洗脱：

表1. 液相梯度条件

时间 *(min)*	A%	B%
0	0	100
1	0	100
12	25	75
15	60	40
20	60	40
20.1	0	100
26	0	100

质谱方法

数据采集方法：MRM（多反应监测）

离子源：ESI源正模式/负模式

实验结果

1. 化合物峰型好，灵敏度高。

正离子模式下目标化合物的提取离子流图见图1，负离子模式各目标化合物的提取离子流图见图2。

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图1.部分正模式化合物提取离子色谱图

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图2.部分负模式化合物提取离子色谱图

2. 数据分析

实验共检测了12个细胞样品用于差异性分析，其中6个为给药组细胞样本，另外6个为对照组样本。利用该方法对这批样本中能量代谢物进行了靶向的分析。为了找出变化差异明显的能量代谢物成分，进行了统计分析，得到每种代谢物在两组样品中的p-value和VIP值，通过p-value< 0.01和VIP>1的筛选，共有92种代谢物有显著变化。从热图（图3）可以发现对照组与给药组有显著差异，在top25的化合物中，给药组中腺苷、鸟苷、肌苷、尿嘧啶等14种物质含量升高，脱氧鸟苷三磷酸、甘氨酸、肌醇、天门冬氨酸、肌氨酸等11种物质含量降低。

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图3. 两组细胞样品的热图（top25）

（G为给药组，C为对照组）

方法特点及优势

在本土化产品Triple Quad^? 6500+建立了330种能量代谢物LC-MS/MS检测方法，可用于细胞中能量代谢物的靶向研究。该方法不仅能高效准确地检测出样品中的代谢物成分，而且能够提供有效地差异性分析，为高通量分析不同模型下能量代谢物的差异提供了快速可靠的方法。SCIEX本土产品Triple Quad? 6500+拥有跟进口产品一样的性能，整套系统具有非常强的抗基质干扰能力，灵敏度高，进而可以简化前处理的流程，且回收率满足要求，仪器重复性好。