SCIEX中国本土化产品Triple Quad? 6500+系统测定血浆中的人参皂苷Rg1、绿原酸和山奈酚

2025-02-08

SCIEX本土化产品

作为全球生命科学分析技术的创新者，SCIEX在2024年10月30日宣布在中国本土化生产SCIEX Triple Quad 6500+系统和QTRAP 6500+系统。这标志着SCIEX本土化战略的又一个里程碑，自2023年在中国苏州成功交付本土化SCIEX Triple Quad 4500系统、QTRAP 4500系统和SCIEX 5500+系列质谱以来，SCIEX 6500+系列高端质谱的2个型号也已经实现中国本土生产。

6500+系统是SCIEX高端三重四极杆/QTRAP质谱产品，在复杂基质中能为不同类型分子提供卓越的灵敏度。它为具有挑战性的检测设计，具备优异的可靠性和稳健性。其主要特点包括快速极性切换和多反应监测（MRM）速度，可兼容更灵活的色谱方法并提高检测通量。无论是利用四极杆功能还是线性离子阱QTRAP增强子离子扫描功能，都能为样品的鉴别、表征和定量带来新颖的发现。

背景

人参皂苷 Rg1（Ginsenoside Rg1）是从人参根茎中提取的主要活性成分之一，是属于原人参三醇型皂苷，它在维持血液循环、改善心肌缺血、抗心律失常、抗休克、镇静、提高智力、抗衰老、抗氧化、抗细胞增殖和抗肿瘤等方面均显示出一定的药理作用。绿原酸（Chlorogenic acid）是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸，广泛存在于多种植物的根、茎、叶和果实中，具有调节糖脂代谢、保肝、抗肿瘤、抗炎、抑菌等多种生物学功能。山奈酚（Kaempferol）属于天然黄酮类化合物，广泛存在于植物根、叶和果实中，具有抗氧化、抗炎、抗癌和预防心血管疾病等多种药理活性。

本文采用中国本土产品 SCIEX Triple Quad? 6500+系统，建立对血浆中的人参皂苷Rg1、绿原酸和山奈酚的快速定量测定方法。

实验方法

液相方法

色谱柱：Phenomenex Kinetex C18 （2.6μm 100*2.1mm）

流动相：A: 水（含0.1%甲酸，10μM乙酸钠）；

B: 乙腈+甲醇（"EN-US">0.1%甲酸，10μM乙酸钠）

流速：0.4 mL/min；

梯度洗脱

表1. 液相梯度条件

质谱方法

数据采集方法：MRM（多反应监测）

离子源：ESI源正模式/负模式

气帘气CUR：35psi

IS电压：+5500V/-4500V

源温度 TEM：550℃

雾化气Gas1：60psi

辅助气Gas2：50psi

碰撞气 CAD：Medium

多反应监测离子通道如表2

表2. MRM离子对信息

实验结果

特异性好，无残留

空白试剂中MRM离子通道无干扰，方法专属性好，特异性高，进高浓度样品后空白试剂无残留。

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图1 典型色谱图（上图为空白血浆基质提取离子色谱图，下图为0.2ng/mL基质加标样品提取离子色谱图）

灵敏度高，线性关系好

配制大鼠血浆标准工作溶液至0.02 ng/mL，0.05 ng/mL, 0.2 ng/mL，0.5 ng/mL，1 ng/mL，5 ng/mL，10 ng/mL和20 ng/mL，经过蛋白沉淀，离心上机分析。血浆基质人参皂苷Rg1的定量下限（LOQ）为0.02ng/mL，绿原酸和山奈酚的LOQ为0.2ng/mL。图2为三种化合物大鼠血浆的线性范围、线性方程和相关系数，线性回归系数r均大于0.995，满足检测要求。

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图2. 绿原酸、山奈酚和人参皂苷Rg1标准曲线和线性回归方程，

线性相关系数r>0.995

回收率好

取6份大鼠空白血浆，平行制备三份加标溶液，浓度分别在LQC和HQC作为质控样品，净化液上机检测。加标样品的准确度均在95.89-111.74%，平行样品的RSD%＜5%，准确度和重现性均满足测试要求，测试结果良好。

表3. 3种化合物不同添加浓度样本回收率表

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实验方法及特点优势

采用蛋白沉淀法对血浆进行前处理，结合Kinetex C18色谱柱，采用梯度洗脱，对三种中药活性成分同时进行定量分析。SCIEX本土产品Triple Quad? 6500+拥有跟进口产品一样的性能，整套系统具有非常强的抗基质干扰能力，灵敏度高，进而可以简化前处理的流程，且回收率满足要求，仪器重复性好。